TransEasy转染试剂是一种水溶性的高分子聚合物,可用于细胞转染实验。本产品对大多数细胞具有较高的转染效率并适用体内的动物实验。相比于传统的脂质体,本产品具有转染效率高,稳定性好,毒性低,操作简单,适用性广且经济等多项优势。 TransEasy转染试剂-苏州欣赛 本品主要适用于动物细胞转染及病毒转染 1.5 mL 4℃:3个月,-20℃:1年 说明书 一份 操作步骤(以24孔板为例) 1. 转染**天,细胞接种于24孔板中,细胞密度为1x10^5个/ml。 2. 稀释质粒。将质粒DNA稀释于50μl无血清、无抗生素的培养基中,混匀。 3. 将TransEasy转染试剂加至DNA稀释液中,漩涡振荡器快速混匀,室温孵育15分钟后获得TransEasy/DNA复合物。 4. TransEasy/DNA复合物(50μl/孔)滴加至细胞培养基中并轻轻混匀。 5. 转染6-8小时后,将原来的培养基更换成新鲜的培养基。24-72小时后可分析TransEasy的转染效率。 表1:不同细胞培养装置转染的细胞接种数量以及相应的转染体系 接种细胞量 转染DNA量 稀释DNA的体积 TransEasy转染试剂的用量 96孔板 1 x10^4 0.1-0.2μg 20μl 0.3-0.6μl 24孔板 5 x10^4 0.6-0.8μg 50μl 1.8-2.4μl 12孔板 1 x10^5 1.2-1.5μg 100μl 3.6-4.5μl 6孔板 0.5 x10^6 3μg 200μl 9μl 10cm培养皿 3-4x10^6 8-10μg 1ml 24-30μl 15cm培养皿 7 x10^6 20-60μg 2-3 ml 60-180μl TransEasy在不同细胞系的转染效率荧光图 HEK-293 MCF-7 图1TransEasy以24孔形式转染HEK-293、MCF-7细胞系,并在转染后48小时拍照观察GFP表达情况。 注意事项: 1. 细胞的状态直接影响转染效率,推荐在50代以内的细胞用于转染实验。 2. TransEasy用量问题。对于大多数的贴壁细胞如HEK-293T、hMSC-TRET、HeLa和MCF-7等,TransEasy(μl)/DNA (μg)的推荐比例为3:1-5:1之间。对于一些不常见或难转染的细胞系,可通过调整TransEasy用量获得较佳的转染比例。 3. TransEasy转染试剂切忌反复冻融。